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2024
29
Aug
新型可持续免疫分析方法有效解决抗原和抗体批次间差异难题
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近日,质标所农产品质量安全检测技术创新团队提出了解决有限型试剂抗体和抗原批次间差异造成的假阳性或假阴性问题的新方法。

以往小分子化合物免疫分析方法构建中,需要制备完全抗原和抗体,而完全抗原制备非常繁琐,导致每批完全抗原制备均一性难以一致,影响抗体制备和免疫分析方法的稳定性。该团队首次制备了莠去津农药重组全长抗体和抗独特型纳米抗体,实现了抗原模拟物替代,大大简化了完全抗原制备流程,解决了抗原和抗体的批次间差异问题,建立了新型可持续免疫分析方法检测莠去津农药残留,相关研究成果发表在《化学工程杂志Chemical Engineering Journal》(IF:13.3)。

该研究以莠去津为模式农药,将已获得的莠去津单克隆抗体的可变区基因进行解码,而后与恒定区基因进行重组,经由哺乳动物表达系统获得了能够替代亲本单克隆抗体的重组全长抗体。将莠去津单克隆抗体免疫羊驼,构建噬菌体展示纳米抗体文库,通过亲和生物淘选获得了不同株具有差异性能的莠去津抗独特型纳米抗体。经条件优化,选择抗独特型纳米抗体AI-Nb-66和重组全长抗体ATR-rAb建立了可持续免疫分析方法,并考察了该方法的灵敏度、特异性、可行性和实用性。最后利用表面等离子共振技术和同源建模与分子模拟手段研究了该方法的特异性识别机制,明确了特异性识别的基团与关键氨基酸残基,为抗体的体外进化提供了理论基础。

该研究得到了国家自然科学基金(32272423),中国农业科学院中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(Y2024PT04),中国农业科学院科技创新工程(CAAS-ASTIP-IQSTAP-02)等项目的支持。

原文链接:https://doi.org/10.1016/j.cej.2024.152039。